Burtséð frá CRISPRi rothöggi eru þar að auki niðurdrepandi( CRISPRi) og örvunar( CRISPRa) bókasöfn, sem nota hæfileika próteinsaðgerða óvirkt Cas9-samrunaprótein (dCas9) til að binda DNA hlut, sem þýðir að genið sem vekur áhuga er ekki skorinn heldur er of tjáður eða kúgaður. Það gerði CRISPR / Cas9 kerfið enn áhugaverðara í genabreytingum. Óvirkt dCas9 prótein mótar gen tjáningarform með því að miða dCas9-bælandi eða virkjara í átt að stýris- eða uppskriftarsíðu hlutlægra gena. Til að bæla gen er hægt að KRAB blanda Cas9 við KRAB effector lén sem gerir complex með gRNA en CRISPRa notar dCas9 sameinað til aðgreindra umritunarvirkjunargeina, sem að auki er beint af gRNA til verkefnisstjórasvæða til að stilla upp tjáningarform.
Forrit
Sjúkdómslíkön
Breyting á erfðafræði í erfðafræði með Cas9 hefur gert kleift að fljótleg og skilvirk kynslóð erfðabreyttra líkana á sviði erfðafræði. Auðvelt er að setja Cas9 inn í hlutlægu frumurnar ásamt sgRNA með plasmíði transfection í reglugerð til að móta útbreiðslu sjúkdóma og viðbrögð frumunnar við og varnir gegn sýkingu. Kunnátta Cas9 sem verður kynnt in vivo gerir kleift að búa til nákvæmari líkön af genaþjónustu og stökkbreytingaráhrifum, allt á hinn bóginn forðast þær stökkbreytingar utan markhóps sem venjulega sést við eldri aðferðir við erfðatækni.
Mynd 171A | Yfirlit yfir transfection og DNA klofnun með CRISPR-Cas9 (crRNA og tracrRNA eru oft sameinuð sem einn þráður RNA þegar hannað er plasmíð) | Nielsrca / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:CRISPR_transfection.png) from Wikimedia Commons
Höfundur : John Kaisermann
Ummæli
Skrifa ummæli