Aðferðir til að mæla FRET skilvirkni

Í flúrljómun smásjá, flúrljómun með leysigeðlisskanna, eins og í sameindalíffræði, FRET, er gagnlegt tæki til að mæla sameindafræðilega virkni í lífeðlisfræði og lífefnafræði, eins og sýnt er með prótein-prótein milliverkunum, prótein-DNA samspili og breytingum á próteinum. Til að fylgjast með myndun complex milli tveggja sameinda er önnur þeirra merkt með gjafa og hin með samþykki. The FRET Verkun eru mældar og notað til að birta samskipti milli merkt fléttur. Það eru nokkrar leiðir til að FRET þjappa verkun FRET með því að fylgjast með breytingum á flúrljómun sem FRET gefinn er frá gjafa eða viðtakanda.

Næmt losun

Ein aðgerð verkun við FRET þéttni er að mæla breytileika í losunarstyrk acceptors. Þegar gjafinn og viðtakandinn eru í nálægð (1–10 nm) vegna víxlverkunar sameindanna tveggja mun losun viðtakans aukast á þeim forsendum að millisameindin FRET frá gjafa til viðtakandans. Til að fylgjast með breytingum á byggingu próteina er markmiðs prótein merkt með gjafa og samþykki við tvo loci. Þegar snúningur eða beygja próteins leiðir til breytinga á fjarlægð eða hlutfallslegri stefnu gjafa og viðtakanda, FRET sést breyting. Ef sameindamilliverkun eða breyting á próteinsniðnaði er háð bindandi bindill, þá FRET tækni er notuð við flúrljósa fyrir uppgötvun á bindill.

Mynd 080A | Teiknimyndarteikning af hugtakinu Förster resonance energy transfer( FRET). | Curtis Neveu (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Concept_of_FRET.png),

Mynd 080A | Teiknimyndarteikning af hugtakinu Förster resonance energy transfer( FRET). | Curtis Neveu (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Concept_of_FRET.png), "Concept of FRET", https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/legalcode frá Wikimedia Commons

Höfundur : Yavor Mendel

Tilvísanir:

Sameindalíffræði Tækni

Tækni sameindalíffræði III

Ummæli